پاورپوینت روش شمارش پلاکت (pptx) 11 اسلاید
دسته بندی : پاورپوینت
نوع فایل : PowerPoint (.pptx) ( قابل ویرایش و آماده پرینت )
تعداد اسلاید: 11 اسلاید
قسمتی از متن PowerPoint (.pptx) :
روش شمارش پلاکت بااستفاده ازهموسیتومترومیکروسکپ فازکنتراست:
نمونه خون وریدی برروی EDTAگرفته می شود.استفاده ازخون مویرگی تغییرات بیشتری رانشان می دهد.
محلول رقیق کننده اگزالات آمونیوم1%درآب مقطراست.
نمونه خون به نسبت 1:100بارقیق کننده رقیق می شود.
پلاکت درزیرمیکروسکپ فازکنتراست به شکل گردیابیضی که غالبا یک یابیش ازیک زائده دارند دیده می شوند.
پلاکتهادر10مربع کوچک (هرطرف ازهموسیتومتر5مربع)شمرش می شوند.چنانچه تعدادکل پلاکتهای شمرده شده کمتراز100است بایدازتعدادمربعهای بیشتری استفاده شود.اگرکل تعدادپلاکتهادرهمه 50مربع کوچک کمتراز50عددباشد،شمارش بایدبارقت 1:20یا1:10تکرارشود.
محاسبه:
شمارش پلاکت=250 * رقت * تعدادمربعها/تعدادپلاکتهای شمرده شده
CVاین روش چنانچه حداقل 100پلاکت شمرده شود11%است.
خون گرفته شده روی EDTAدر20درجه به مدت 5ساعت ودر40درجه به مدت 24ساعت نتایج رضایت بخشی خواهد داشت.
1
چنانچه تجمع پلاکت وجودداشته باشدآزمایش بایدبانمونه جدید تکرارشود.
شمارش الکترونیک: بکارگیری تکنیک دقیق درهمه مراحل شمارش پلاکت اهمیت زیادی دارد.همچنین محلول رقیق کننده بایدعاری ازذرات اضافی بوده ،ظروف ومنفذدستگاه شمارشگرتمیزباشند.
دردستگاههایی که پلاسمای غنی ازپلاکت استفاده می کنند،زیادبودن تعدادRBCدرپلاسماباعث شمارش کاذب پایین خواهدشد.
شمارش WBCبالابطورکاذب باعث پایین بودن شمارش پلاکت می شود.
پلاکتهای بزرگ (دراندازه RBC)توسط دستگاه شمارش نمی شوندوباعث شمارش پایین کاذب می شوند.
RBCهای بسیارمیکروسیتیک یاقطعات RBCباعث شمارش بالای کاذب می شوند.
قطعات سیتوپلاسم لکوسیتها که گاه درلوسمی هازیاداست می تواندبطورکاذب شمارش پلاکتهارابالاببرد.
هنگامیکه پلاکتهابه نوتروفیل می چسبند(ساتلیتیسم پلاکتی )شمارش پلاکت بطورکاذب پایین است .همچنین درصورت کلامپ شدن پلاکتهابه دلیل وجودآگلوتیینین ها،اگرگاسیون خودبخودی یاایجادلخته شمارش پلاکت پایین خواهدبود.
2
هرزمان که شمارش پلاکت انجام شده توسط دستگاه مشکوک باشد(شمارش خیلی پایین یاخیلی بالایاوجودflag)پیش ازگزارش نتیجه بایدگسترش خون بررسی شودودرصورت لزوم شمارش بروش هموسیتومترانجام شود.
شمارش رتیکولوسیت:
رتیکولوسیتهاگلبولهای قرمزنابالغ بدون هسته ای هستندکه دارای RNAبوده وبه سنتزHbادامه می دهند.
هنگامی که خون به مدت کوتاهی درحضورنیومتیلن بلویابریلیانت کریزیل بلوانکوبه شود،RNAبصورت یک کمپلکس رنگ ریبونوکلئوپروتئین رسوب می کند.درنمای میکروسکوپی کمپلکس بصورت یک شبکه (رتیکولوم )آبی تیره یاگرانولهای آبی تیره مشخص می شود.
معرف 1%نیومتیلن بلودرمعرف سیترات سالین (یک قسمت سیترات سدیم 30g/l+4قسمت کلریدسدیم 9g/l)
روش :سه قطره معرف راباسه قطره خون دریک لوله آزمایش مخلوط کرده وبمدت 15دقیقهدردمای اتاق قرارمی دهیم .سپس دوگسترش تهیه کرده وخشک می کنیم .درصدرتیکولوسیتهادربین حداقل 1000گلبول قرمز تعیین میشود.
3
شمارش مطلق رتیکولوسیتها حاصل ضرب درصدآن درشمارش گلبولهای قرمز است.
درافرادبالغ سالم درصدرتیکولوسیت 5-1/5%وشمارش مطلق آن 84-24می باشد.
درنوزادان هنگام تولددرصدلکوسیت 6/5-2/5است ودرانتهای هفته دوم زندگی به حدبالغین می رسد.
ازآنجاکه رتیکولوسیتها گلبولهای قرمز نابالغ هستند،تعدادآنهاتخمین زننده میزان تولیدگلبولهای قرمز است0
ازآنجاکه عملاتعدادکمی رتیکولوسیت شمارش می شوند،خطانسبتا زیاداست .
محدوده اطمینان 95%رامی توان بصورت زیربیان کرد:
R±2√R₍100-R⁾∕Ν
درصدشمارش رتیکولوسیت وNتعدادRBCهای شمارش شده است.
امروزه روش شمارش فلوسیتومتری رتیکولوسیتها قابل دسترس است .
رنگهای فلورسنت مانندآکریدین اورانژیاتیوفلاوین Tبه RNAمتصل شده وشناسایی رتیکولوسیتهاراامکانپذیر می سازند.ازآنجاکه تعدادزیادی سلول شمارش می شونددقت وصحت این روش بسیاربیشتراست.
4
:ESRفاکتورهای مختلفی درESRدخالت دارند:
فاکتورهای مربوط به پلاسما:
افزایش میزان فیبرینوژن وبه میزان کمتری افزایش α2،βوγگلوبولینهاباعث افزایش ESRمی شود.
خارج کردن فیبرینوژن ازراه دفیبریناسیون سدیمان راکاهش می دهد.
آلبومین ولکتین ESRراکاهش داده وکلسترول آنراافزایش می دهد.
فاکتورهای مربوط به گلبول قرمز:
آنمی باعث افزایش ESRمی شود،زیراتغییرات درنسبت اریتروسیت به پلاسماباعث افزایش تشکیل رولو می شود.
ESRباوزن توده سلولی نسبت مستقیم وباسطح آن نسبت عکس دارد.
میکروسیتهانسبت به ماکروسیتهاآهسته تررسوب می کنند،درماکروسیتهانسبت سطح به حجم کاهش یافته است.
دررولونیزنسبت سطح به حجم کاهش یافته وESRافزایش می یابد.
5
گلبولهای قرمزباشکل غیرطبیعی مانندسیک سل یااسفروسیتهاباعث عدم تشکیل رولووکاهش ESRمی شوند.
مراحلESR:
سه مرحله درESRقابل مشاهده است:
1-در10دقیقه اول رسوب به مقدارکم صورت میگیردزیراهنوزرولوتشکیل نشده است.
2-به مدت تقریبا 40دقیقه رسوب باسرعت ثابتی صورت می گیرد.
-در10دقیقه آخربه دلیل متراکم شدن گلبولهادرته لوله سرعت رسوب کاهش می یابد.
روش ها:
روش وسترگرین:
این روش به دلیل سادگی بطورگسترده ای مورداستفاده است،وروشی است کهNCCLSبه عنوان روش استانداردتوصیه نموده است.
وسایل: 1-لوله وسترگرین پیپتی به طول 30سانتی متروقطرداخلی 2/5میلیمتراست که روی آن به فواصل یک میلیمترازصفرتا200درجه بندی شده است .این پی پت گنجایش حدود1میلیمتردارد.
2-رک وسترگرین
6
معرف :ازمحلول 0.105مولارسیترات سدیم به عنوان ضدانعقاداستفاده می شود.
31گرم Na3C6H5O7.H2Oبه 1لیترآب مقطراضافه می شود،این محلول راصاف کرده ودریخچال نگهداری می نمایند.
4میلی لیترخون به 1میلی لیترسیترات سدیم اضافه می شود.
اگردرهنگام خواندن نتیجه حدودپلاسماوگلبول قرمزواضح نباشداولین نقطه ای که تراکم کامل صورت گرفته به عنوان عددسدیمان درنظرگرفته می شود.
روش وسترگرین تغییریافته :
2میلی لیترازخون حاوی EDTAکه بخوبی مخلوط شده با0/5میلی لیترسیترات سدیم 3/8%یا0/5میلی لیترکلریدسدیم رقیق می شود.
ESRباافزایش سن بتدریج افزایش می یابد.مقادیرحداکثرنرمال اصلی وسترگرین mm/h10برای مردان وmm/h20برای زنان است.
براساس مطالعات جدیداین مقادیربایدبه صورت زیرباشد:
مرد زن :
15 20 سن زیر50سال
20 30 ” بالای50 ”
7
30 42 سن بالای 85سال
منابع خطا:
اگرغلظت ضدانعقادبالاترازمقدارتوصیه شده باشد،ESRافزایش می یابد.
هپارین پتانسیل غشایی زتارا تغییرمی دهدومناسب نیست.
وجودحباب هوادرپیپت ESRراتغییرمی دهد.
وجودهمولیزESRراتغییرمی دهد.تمیزبودن لوله اهمیت دارد.
کج شدن لوله باعث افزایش ESRمی شود.3درجه انحراف مقدارESRرا30%افزایش می دهد.
دمای اتاق باید25-20درجه باشد،دمای پایین تریابالاترESRراتغییرمی دهد،اگرنمونه دریخچال نگهداری شده بایدبه دمای اتاق برسد.
آزمایش بایدحداکثر2ساعت پس ازجمع آوری خون یا12ساعت پس ازنگهداری دریخچال انجام شود.اریتروسیتهادراثرماندن تمایل به کروی شدن دارندکه باعث عدم تشکیل رولووکاهش ESRمیشود.
8
ZSR(Zeta Sedimentation Rate):
یک سانتریفوژمخصوص(زتافیوژ)لوله های مویینه رادرموقعیت عمودی در4دوره 45ثانیه ای می چرخاند.این کارباعث می شودکه تشکیل ورسوب رولودرمدت 3دقیقه انجام گیرد.سپس لوله مویینه رامانندهماتوکریت قرائت می کنند(زتاکریت).سپس مقدارهماتوکریت رابرزتاکریت تقسیم کرده ونتیجه راکه بصورت درصدبیان می شودZSRمی نامند.
این روش توسط آنمی تحت تاثیرقرارنمی گیرد.حساسیت آن نسبت به تغییرات فیبرینوژن همانندوسترگرین است.برای انجام آن تنها100میکرولیترخون لازم است .مقدارنرمال بالغین 54-41%برای هردوجنس است.
دستگاههای ریدرسدیمان:
دراین دستگاههانقطه پایان بااستفاده ازاشعه مادون قرمزوپس از 20دقیقه مشخص می شود.این روش مطابقت خوبی باروش وسترگرین داردوروشی ایمن تر،سریعترواستانداردشده است.
روش میکرو:
درسال1980Barretروش ESRمیکرورابااستفاده از2/.میلی لیترخون وباکمک یک لوله پلاستیکی به طول mm230وقطرداخلی mm1شرح داد.
9
